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2020年郑集高级中学高一分班考试情况

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为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将陆地棉的酶D基因与拟南芥叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜叶片细胞并获得了转基因油菜品种。

(1)从陆地棉基因文库中获取酶D基因,一般用PCR技术扩增,PCR扩增过程中,需加热至90~95 ℃,其目的是____________________________;加热至70~75 ℃时,互补链可在____________________酶的作用下延伸。

(2)如图甲,选用限制酶________处理两个基因后再用____________酶处理,得到________(填图中字母)端相连的融合基因。

(3)将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T­DNA中,构建________________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含__________(填“氨苄青霉素”“卡那霉素”“四环素”或“链霉素”等抗生素)的固体平板上培养得到单菌落,再利用液体培养基振荡培养,得到用于转化的侵染液。

(4)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是__________________________,进一步筛选后获得转基因油菜。

(5)在分子水平上,用________________方法检验融合基因是否表达成功。

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